拟南芥茎尖干细胞决定基因WUSCHEL的泛素化研究及WUS相互作用蛋白的筛选

【摘要】高等植物茎端分生组织的调控是一个复杂而精细的过程,WUS是茎尖干细胞决定基因,与茎端分生组织干细胞的发生和维持都密切相关。本论文就前人还没有研究过的WUS蛋白的泛素化过程及其相互作用蛋白展开研究。首先本实验建立了离体的蛋白分析系统,将纯化的WUS蛋白加入拟南芥幼苗的无细胞提取液中反应,然后检测其水平的变化,结果证明WUS蛋白在无细胞提取液中被逐渐降解,并且这种降解不能被广谱型蛋白酶抑制剂PMSF抑制,却可以被适当浓度的蛋白酶体抑制剂MG132、ALLN抑制。用蛋白酶体抑制剂来处理超表达WUS的转基因幼苗,发现经处理后其体内原本水平很低的WUS蛋白显著升高,得到与离体实验一致的结果,表明超表达WUS的转基因植株中的WUS蛋白通过泛素蛋白酶体途径被降解了。为了找到介导WUS蛋白泛素化的E3连接酶,本实验又建立了WUS蛋白的酵母双杂交系统,以WUS蛋白作为诱饵蛋白,在拟南芥cDNA文库中找到了多个与其可能存在相互作用的蛋白质,这些蛋白的发现为进一步研究WUS蛋白提供了基础和思路。
【作者】王晓爽；
【导师】黄涛；
【作者基本信息】厦门大学，遗传学，2014，硕士
【关键词】WUS；泛素蛋白酶体途经；酵母双杂交；

【参考文献】
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